Листья должны быть собраны с растений, находящихся в одинаковых экологических условиях (уровень освещенности, увлажнения и т.д.) Рекомендуется выбирать растения, растущие на открытых участках (полянах, опушках), поскольку берёза является светолюбивым видом, условия затенения могут быть для них стрессовыми и повлиять на стабильность развития. Для исследования рекомендуется выбирать растения, достигшие генеративного возрастного состояния. Рекомендуется собирать листья из одной и той же части кроны с разных сторон растения. У березы повислой листья лучше собирать из нижней части кроны дерева с максимального количества доступных веток, относительно равномерно вокруг дерева. Тип побега также не должен изменяться в серии сравниваемых выборок. У березы повислой используются листья с укороченных побегов. Размер листьев должен быть сходным, средним для данного растения. Поврежденные листья могут быть использованы для анализа, если не затронуты участки, с которых будут снимать измерения. Рекомендуется собирать с растения несколько больше листьев, чем требуется, на тот случай, если часть листьев из-за повреждений не сможет быть использована для анализа. Каждая выборка должна включать в себя 100 листьев (по 10 листьев с 10 растений). Листья с одного растения лучше хранить отдельно, чтобы в дальнейшем можно было проанализировать полученные результаты индивидуально для каждой особи. Для этого рекомендуется собранные с одного дерева листья связывать за черешки. Все листья, собранные для одной выборки, складывают в полиэтиленовый пакет, туда же помещают этикетку с указанием номера выборки, места сбора (делают максимально подробную привязку к местности), даты сбора. Никакой специальной обработки и подготовки материала не требуется. Материал может быть обработан сразу после сбора или позднее. Для непродолжительного хранения собранные материал можно держать в полиэтиленовом пакете на нижней полке холодильника. Для длительного хранения можно зафиксировать материал в 60%-м растворе этилового спирта или гербаризировать.

Измерения проводят в камеральных условиях линейкой с точностью до 1 мм и транспортиром с точностью до 1°. Для промеров лист помещают перед собой стороной, обращенной к верхушке побега. Лист складывают пополам, совмещая верхушку с основанием листовой пластинки. Потом разгибают лист и по образовавшейся складке производят измерения.

С каждого листа снимают показатели по пяти промерам с левой и правой сторон листа (см. рис.): 1 - ширина левой и правой половинок листа (в мм); 2 - длина второй жилки от основания листа; 3 - расстояние между основаниями первой и второй жилок; 4 - расстояние между концами этих же жилок; 5 - угол между главной жилкой и второй от основания листа жилки.

Рис. Промеры листовой пластинки березы (пояснения в тексте)

Результаты измерений заносятся в таблицу 1.

Разница между промерами левых и правых половинок листа делится на сумму промеров по каждому признаку. Например, 26 - 23:49 = 0,06. Полученное значение (0,06) внести в соответствующую строку таблицы 2.

Сумму величин асимметрии по 5 признакам разделить на 5. Получится величина асимметрии листа (по 10 листьям), разделить на 10, получится средняя величина показателя стабильности развития для данной выборки (см. таблицу 3).

Для оценки степени нарушения стабильности развития удобно использовать пятибалльную шкалу (см. таблицу 3). Пока такая шкала предложена только для березы, поскольку для этого объекта собран достаточно обширный материал. Первый балл шкалы – условная норма. Значения интегрального показателя асимметрии (величина среднего относительного различия на признак), соответствующие первому баллу, наблюдаются обычно в выборках растений из благоприятных условий произрастания, например, из природных заповедников. Пятый балл – критическое значение, такие значения показателя асимметрии наблюдаются в крайне неблагоприятных условиях, когда растения находятся в сильно угнетенном состоянии. Если величина асимметрии листьев достигает критического значения, то следует предполагать высокую степень загрязнения окружающей среды промышленными и/или транспортными выбросами.

Нужно помнить, что для растений неблагоприятными могут быть и климатические факторы, особенно в северных районах. Поэтому желательно одновременно провести сбор листьев берёзы для последующего сравнения в предположительно «чистом» участке или территории, наиболее удалённой от источников выбросов, не испытывающей нагрузки антропогенных факторов.

Источник: Радченко Н.М., Шабунов А.А. Методы биоиндикации в оценке состояния окружающей среды: Учебно-методическое пособие. – Вологда: ВИРО, 2006. – 148 с.

С помощью методики можно также определить флуктуирующую асимметрию таких видов растений как: сныть обыкновенная (измеряется первая жилка от основания черешка), мать-и-мачеха обыкновенная (измеряется вторая жилка от основания черешка), клевер ползучий (измеряется первая жилка от основания черешка), тополь бальзамический (измеряется первая жилка от основания черешка), клён остролистный (измеряется средняя жилка боковых пластин справа и слева) и клён ясенелистный (измеряется первая жилка от основания черешка). Обработка заключается в измерении длин жилок на листьях с правой и левой сторон листа. Интерес представляют не размеры жилок, а разница их длины справа и слева (нарушение симметрии). Полученные результаты можно сравнить с табличными данными (см. таблицу 4).

При использовании в работе других объектов необходимо сформулировать соответствующие цель, задачи, гипотезу, указать конкретный объект и предмет исследования.

Источник: Биологический контроль окружающей среды: биоиндикация и биотестирование: учеб. пособие для студ. высш. учеб. заведений / под ред. О.П. Мелеховой, Е.И. Сарапульцевой. – М.: Академия, 2008. – 288 с.